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DIY判斷細胞的支原體污染

更新時間:2021-09-27  |  點擊率:1418

 

細菌真菌污染還有跡可循,起碼顯微鏡下能夠清晰地看到,但是支原體個子小,不易觀察,由于繁殖速度比較慢,期感染幾乎沒有癥狀。經常稍不留意,就中了支原體的「陰招」。統計顯示,全球大約有60%左右的細胞培養存在或曾經存在過支原體污染。


癥狀1:細胞生長緩慢甚至死亡?

被廣泛使用的細胞培養基,不僅給細胞提供支持和養分,對于支原體而言,也是天堂一般的存在。

 

與細胞培養高度重合的培養條件,注定了支原體要與細胞共同競爭有限的生存資源。

 

早有研究表明[1],一些支原體(包括為常見的人型支原體、發酵支原體、精氨酸支原體等),通過精氨酸脫亞胺酶分解精氨酸來供能。當這些支原體混入細胞培養體系后,會與細胞爭精氨酸,導致細胞「吃不飽飯」,出現營養不良的癥狀:生長速率異常、活力下降、易脫壁等等。

而精氨酸又是細胞組蛋白的重要組成成分,缺乏精氨酸會嚴重影響組蛋白合成,引起染色體斷裂。再加上細胞處于長qi饑餓的狀態,終導致細胞生長變慢甚至死亡。


  支原體感染癥狀2:細胞變形、碎片增加、易聚團、有小黑點?

 

經過支原體的這一番操作,細胞結構已經被嚴重破壞,隨之而來的就是細胞形態改變、細胞易聚團、大面積細胞凋亡制造的蛋白碎片(也就是培養基中的碎片和小黑點)

 

圖片


 

支原體也是如此——當培養體系中感染了支原體并大量繁殖的時候,會向外排放代謝產物,影響體系中的PH,加快培養基變黃的速度。


                                                             支原體感染癥狀3:培養基易變黃?

綜上所述,如果你培養的細胞出現以下情況,基本可以確定是支原體感染了,不放心的話可以再配合支原體檢測試劑檢測神器幫你揪出培養基中的支原體!進一步確認。

 


除了影響細胞活力,支原體還會給細胞帶來的幾百種基因表達的改變,包括編碼受體、離子通道、生長因子的基因和癌基因等方面[4]。它包含高度富含免疫原性的脂蛋白,可以錨定在胞膜的外表面,被TLR2等免疫細胞的受體識別。激活NF-kB途徑,進一步導致細胞活化[5],偏離終的實驗結果。

 

細胞培養小課堂到這里就結束了,希望可以幫你解決實驗上的一些疑惑!





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