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淺談血清培養基的劣勢及潛在風險

更新時間:2019-03-04  |  點擊率:2113

疫苗的作用主要是預防傳染性疾病、新型流行病及暴發流行,尤其如乙型肝炎呈世界流行,是性的健康問題。健康人群是主要的接種對象,因此,保證疫苗的質量和安全性是重要的問題,其關鍵在于做好生產方式和過程的把關,保證生產用原材料的安全和質量。在疫苗生產過程中,為了獲得高滴度高質量的病毒培養液,需要高密度的培養細胞基質。

 

 

細胞高密度培養主要從培養基著手,通過補充某些營養添加因子優化培養基促進細胞生長。常用的添加因子是牛血清,它能夠提供給Vero細胞在體外貼附培養的必需物質,如貼壁因子、生長因子、激素、營養物質,在體外模擬穩定的環境,促進細胞高密度生長。但是血清是成分復雜的混合物,其所含的組分不*明確,因此,細胞培養技術中血清的使用存在諸多的缺點和風險。

 

,使用血清較大的風險是向疫苗產品中引入血源性病原生物污染的潛能,從而影響疫苗的生產工藝和安全問題;

 

第二,牛血清對細胞具有毒性作用和抑制作用,牛血清的成分復雜,在給細胞提供營養的同時會負向影響Vero細胞在微載體表面的貼附效果。據文獻報道,培養基添加的牛血清白蛋白易吸附在微載體表面,使細胞在微載體表面的貼附率明顯下降;

 

第三,血清在質量上存在很大的批間差異,增加了疫苗生產工藝的不穩定性和疫苗質量控制的難度,從而影響疫苗的質量;

 

第四,血清價格昂貴,增加了生產工藝規模化放大的成本;

 

第五,血清所含的多種雜質如蛋白、激素、多肽、細胞因子等給疫苗生產的后續純化工藝增加了困難。

 

血清的這些不利因素促使動物細胞無血清培養基取代傳統的牛血清培養基已成為病毒性疫苗生產的一個重要發展趨勢。

 

Vero細胞是疫苗生產的常用細胞,常用的基礎培養基有M199、DMEM和F12等,締一生物為您介紹一款適用于Vero細胞的無血清培養基,由上HiMedia公司生產的M199的改良款——SFRE199-1和SFRE199-2。

 

SFRE-199系列將M199標準配方中的精氨酸增加到150mg/L,半胱氨酸增至4mg/L,胱氨酸增至40mg/L,谷氨酰胺增至300mg/L,谷氨酸增至75mg/L,甘氨酸增至100mg/l,組氨酸增至40mg/L,酪氨酸增至80mg/L,以獲得較好的細胞生長而未表現出毒性。

 

另外,SFRE-199系列還降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于,前者含有Hank's鹽,而后者所含為Earle's鹽。與加胎牛血清的常規培養基比較,細胞生長速率、產量和蛋白容量均相同,均在移植后第6天單層細胞達到充分融合。

 

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在細胞培養、微生物培養和檢測領域,一如既往地為您帶來的服務。

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